TRIS常用生物緩沖液體系之TE、TAE、TBE緩沖液
TRIS由于其廣泛的用途和可配置多種緩沖液的作用當之無愧成為生物緩沖劑中的扛把子,TE、TAE、TBE緩沖液就是其中比較常見的幾種,接下來我們就詳細介紹一下這三種看著就很類似的生物緩沖液。
組成成分
TE緩沖液:由TRIS+EDTA按比例配制而成。
TAE緩沖液:由TRIS+EDTA+醋酸按比例配制而成。
TBE緩沖液:由TRIS+EDTA+硼酸按比例配制而成。
用途
TE緩沖液:多用于溶解劑或者保存劑,可用于DNA的穩定與存儲,也用于滅活型病毒保存液中。
TAE緩沖液和TBE緩沖液:都是生物學中使用頻繁的核酸電泳緩沖液,主要用于DNA瓊脂糖凝膠電泳實驗中。
TAE緩沖液和TBE緩沖液的選擇
TEA緩沖液:在質量電泳大于13Kb的片段時分離效果最好,0.8%的瓊脂糖凝膠中遷移速度更快,因此多用于回收DNA片段。其缺點也不容忽視,TEA的緩沖容量小,緩沖能力弱,并且不適合使用在長時間電泳實驗中。
TBE緩沖液:緩沖能力強,電泳小于1Kb的片段時分離效果最好,在2%的瓊脂糖凝膠上,遷移速度更快,且適合長時間的電泳實驗、分辨率高是其優點。TBE中的硼酸是一種酶制劑,不適用于分離電泳的DNA酶切反應,硼酸也會影響DNA的回收率。另一點需要注意的是TBE濃溶液置放時間過長容易產生沉淀物,因此建議即配即用。
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