葉綠素是與光合作用有關的最重要的色素。光合作用是通過合成一些有機化合物將光能轉化為化學能的過程。葉綠素實際上存在于所有能創造光合作用的生物中,包括綠色植物、原核藍綠藻(藍細菌)和真核藻類。葉綠素從光線中吸收能量,然后利用能量將二氧化碳轉化為碳水化合物,這可以被葉綠素儀準確檢測到。
植物葉綠素的測定方法;
(1)材料:鮮(或干)植物葉。
(2)設備:1)分光光度計;2)電子頂裝秤(電感0.01g);3)砂漿;4)棕色容量瓶;5)小漏斗;6)定量濾紙;7)吸水紙;8)擦紙;9)滴管。
(3)試劑:1)95%乙醇;2)石英砂;3)碳酸鈣粉末。黑暗中2h,0.5g,25ml
(4)取新鮮植物葉片(或其他綠色組織)或干燥材料,擦去組織表面的污垢,切成片(去掉中脈),混合均勻。
(5)稱取0.2g切碎的新鮮樣品,共3份,分別放入研缽中,加入少量石英砂和碳酸鈣粉及2 ~ 3ml 95%乙醇,研磨成均勻的漿液,然后加入10ml乙醇,繼續研磨至組織變白。靜置3 ~ 5分鐘。
(6)取一張濾紙,置于漏斗中,用乙醇潤濕,將提取液沿玻璃棒倒入漏斗中,過濾至25ml棕色容量瓶中,用少量乙醇將研缽、研磨棒和殘渣沖洗數次,最后與殘渣一起倒入漏斗中。
(7)用滴管吸取乙醇,將濾紙上的葉綠體色素全部洗入容量瓶中。直到濾紙和殘渣中沒有綠色。最后用乙醇調節體積至25ml,搖勻。
(8)將葉綠體色素提取液倒入光學直徑為1cm的比色皿中,以95%乙醇為空白,在663nm和645nm波長處測量吸光度。